大鼠酪氨酸羥化酶(TH)酶聯(lián)免疫試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗大鼠酪氨酸羥化酶(TH)抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的大鼠酪氨酸羥化酶(TH)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠酪氨酸羥化酶(TH)抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗大鼠酪氨酸羥化酶(TH)抗體與結(jié)合在包被抗體上的大鼠酪氨酸羥化酶(TH)結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。elisa試劑盒白介素類加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,大鼠酪氨酸羥化酶(TH)濃度與OD450值之間呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中大鼠酪氨酸羥化酶(TH)的濃度。
大鼠酪氨酸羥化酶(TH)酶聯(lián)免疫試劑盒一次ELISA實(shí)驗(yàn)需要多長(zhǎng)時(shí)間?
雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要4-4.5小時(shí),競(jìng)爭(zhēng)ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí)。
血清樣本如何處理?
全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
血漿樣本如何處理?
大鼠酪氨酸羥化酶(TH)酶聯(lián)免疫試劑盒應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
尿液樣本如何處理?
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
細(xì)胞上清液樣本如何處理?
大鼠酪氨酸羥化酶(TH)酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細(xì)收集上清。elisa試劑盒白介素類保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。