器材
(1) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,人ELISA試劑盒ELISA檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
(2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
試劑
(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸餾水至1000ml
(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
(3) 稀釋液: 牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 人ELISA試劑盒加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) 終止液(2M H2SO4): 蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
(6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml 底物緩沖液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液: 人ELISA試劑盒ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl ?。?) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
(9) 正常人血清和陽性對(duì)照血清。