培養(yǎng)基中的碳、氮比例很重要。若培養(yǎng)基中碳源供應(yīng)不足時(shí),易引起菌種的過(guò)早衰老和自溶;若氮源過(guò)多或過(guò)少,則會(huì)引起菌絲過(guò)于旺盛生長(zhǎng)或生長(zhǎng)緩慢,對(duì)菌種培養(yǎng)不利。菌種培養(yǎng)基中的pH值也是影響菌絲生長(zhǎng)的重要因素。一般培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后會(huì)使pH值有所下降,必須經(jīng)檢驗(yàn)后加以調(diào)整。調(diào)節(jié)pH值時(shí),可用石灰澄清液,也可用氫氧化鈉或鹽酸。在配制培養(yǎng)基時(shí),為了避免沉淀物的生成而造成營(yíng)養(yǎng)物的損失,應(yīng)掌握加入各種營(yíng)養(yǎng)物的順序。一般應(yīng)先加入緩沖化合物,溶解后加入主要元素,然后是微量元素,zui后加入維生素等,是前一種營(yíng)養(yǎng)成份溶解后再加入第二種營(yíng)養(yǎng)成份。此外,培養(yǎng)基加入糖類時(shí),應(yīng)采用適當(dāng)?shù)臏缇椒?,因葡萄糖在高壓下易被破壞,多糖和雙糖也因高溫易被水解和變質(zhì)。
培養(yǎng)基菌種的選擇和鑒定方法討論:
1.待鑒定的培養(yǎng)基菌種一定是純種
如果菌種不純,所觀察到的現(xiàn)象則是混合現(xiàn)象,這樣自然不會(huì)得到正確的結(jié)果。因此在鑒定之前,首先要將菌種純化。純化方法,一般有2種:平板劃線單菌落分離法和單細(xì)胞分離法。前一種操作簡(jiǎn)便,效果良好,適用范圍廣。
2.選一本比較好的培養(yǎng)基鑒定手冊(cè)
鑒定時(shí)以此手冊(cè)為標(biāo)準(zhǔn),開(kāi)展鑒定工作。根據(jù)多數(shù)人的經(jīng)驗(yàn),我們認(rèn)為在細(xì)菌鑒定方面,使用《伯杰氏鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》一書(shū)較為合適。在具體鑒定時(shí),可參看*微生物研究所細(xì)菌分類組編著的《一般細(xì)菌常用鑒定方法》一書(shū)。在放線菌鑒定方面,可以參看中科院微生物研究所編著的《鏈霉菌鑒定手冊(cè)》(1975年)一書(shū)。真菌的鑒定可參看中科院微生物研究所編著的《常見(jiàn)與常用真菌》(1973年)一書(shū)。荷蘭羅德的《酵母的分類研究》(1970年)一書(shū),對(duì)酵母菌的分類有很大的實(shí)用價(jià)值。
3.要有合適的培養(yǎng)基鑒定方法
微生物種類繁多,特征各異,性狀有主次之分。因此,在鑒定某種微生物時(shí),要選用合適的鑒定方法,確定主要的測(cè)試項(xiàng)目。例如,鑒定的微生物若是霉菌,則菌落形態(tài)觀察十分重要;若是酵母菌,有性繁殖的方式、特征以及生理生化特征中的糖的發(fā)酵和同化,硝酸鹽的同化就是主要指標(biāo)。